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微电泳法

微电泳法是一种利用外加电流通过含有解离物质的微电极溶液的方法。当微电极连接正极,头皮连接负极时,阳离子物质会被释放出来。微电泳过程中,解离物质的释放量与其通过的电荷量呈正比例关系。通常使用微电极电流来衡量解离物质的释放量。

器材

微电泳法使用的器材包括五管或七管微电极,这些微电极的尖端直径约为1μm,七管总直径在5-8μm之间。如果填充的小分子物质如NMDA、Glu等,尖端直径可以更小,达到0.5μm,七管总和为3-4μm,以便实现更高的电阻。对于大分子肽类,尖端直径不应超过10μm,以免泄漏。为了确保微电泳的有效性和准确性,应结合整体功能进行分析。

充灌液

微电泳法的充灌液选择和制备至关重要。通常使用较高浓度的NaCl(4mol)或氯化钾(3mol)来提高电极尖端的离子浓度,从而获得低阻抗微电极。其中一根周边管用于平衡电流,其他管可根据需求填充不同的灌注液。常用的充灌方法包括压力法、充灌注、真空法和乙醇法,其中玻璃纤维法最为常见。充灌液的浓度不宜过高,一般在5-500mmol/L之间,以保持良好的传导性和稳定性。对于强效化学物质,建议使用较低浓度的NaCl作为溶剂,以避免药物扩散引起不必要的生物学效应。pH值的选择应考虑溶质的溶解度和稳定性,一般控制在3.5-4.0之间。无法离子化的物质可以通过微压力法注射。此外,为了避免药物泄漏,可以施加一个反向的“迟滞电流”,以抵消药物的泄漏趋势。这种迟滞电流的大小应根据具体情况调整,一般在10-30nA范围内。对于强效物质,可能需要更大的迟滞电流。

参考资料

微电泳法研究变性淀粉对表面活性剂的吸附作用.百度学术搜索.2024-11-08

微电泳法研究变性淀粉对表面活性剂的吸附作用.百度学术搜索.2024-11-08

用微电泳法研究改性硅藻土的表面性质.百度学术搜索.2024-11-08