凝固酶阴性葡萄球菌

葡萄球菌是临床较常见的感染菌，随着大量头孢菌素尤其是第三代头孢菌素等高效广谱抗菌药物的广泛使用，耐甲氧西林葡萄球菌（耐甲氧西林金黄色葡萄球菌）在全球范围内不断增加，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）作为MRS和凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）家族中的一员.

简介

葡萄球菌检出率和多重耐药性呈逐年增高趋势，已成为医院感染的主要病原菌之一。MRCNS为低毒力条件致病菌，感染后症状不典型，且呈现多重耐药现象，给临床诊断和治疗带来一定困难，高效的检验方法已是必然需要。

生物学性状

CNS的形态、排列和染色性与金黄色葡萄球菌相似，无鞭毛、荚膜和芽孢，不产生血浆凝固酶。表皮葡萄球菌产生白色色素，腐生葡萄球菌产生柠檬色色素，不分解甘露醇。CNS包括表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、木葡萄球菌、溶血葡萄球菌、头状葡萄球菌、华纳葡萄球菌、模仿葡萄球菌、木糖葡萄球菌和猿类葡萄球菌等30余种。其中，表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌在CNS引起的感染中是较为常见的致病菌。

致病性

CNS的致病机制可能与其产生的细胞外黏质(extracellular slime 实体,ESS)有关。黏质由中性糖类化合物、糖醛酸和氨基酸组成

1、尿路感染

表皮葡萄球菌常引起青年女性泌尿道感染，仅次于大肠杆菌引起的泌尿道感染。

2、败血症

CNS引起的败血症，常见于新生儿。其引起的败血症居常见病原菌引起的第三位，仅次于大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌。

免疫性

手术和介入治疗

骨和关节修补术、心瓣膜术、器官移植、动脉导管及心脏起搏器植入等均可造成CNS感染。

微生物学检查

CNS根据血浆凝固酶、甘露醇及色素产生情况与金黄色葡萄球菌进行区别，也可进行细菌生化试验、质粒图谱、耐药谱等联合鉴定。

防治原则

必须采取相应措施，加强医院感染的监控管理，加强对术前、术后、医务人员、空气和周围环境的消毒，定期对临床分离菌株的耐药性进行分析，制定抗感染方案以控制医院感染。治疗常用呋喃妥因、氧沙星和万古霉素。

玻片法试管法

材料 菌株为实验室保存菌株，新鲜未稀释的兔血浆（或人血浆），生理盐水，金黄色葡萄球菌(ATCC25923)与表皮葡萄球菌(ATCC12228)质控菌株。

玻片法：取未稀释的新鲜兔血浆和生理盐水各一滴分别滴于载玻片，取待检菌菌落少许，分别混合，立即观察结果，细菌聚集成团块或无法混匀为阳性，反之阴性，用于测定凝集因子；

试管法：取3支试管，各加0.5ml1：4稀释的新鲜兔血浆，加1～3个菌落入1试管，充分研磨均匀，2、3试管加凝固酶阳性、阴性株作对照，置37℃水浴3～4h，观察结果，细菌是试管内血浆凝固呈胶冻状为阳性，反之为阴性，用于测定游离型凝固酶。

方法评价 公认采用兔血浆较好，许多实验室用病人血浆或血库血浆来代替，因病人血浆中含有各种抗体、药物，尤其某些病人血浆中纤维蛋白含量低下或受各种不同抗凝剂的影响甚至血浆被污染，故一定程度上影响了结果的准确性。采用玻片法检测凝聚因子，有10%～15%金黄色葡萄球菌呈假阴性，因此必须用试管法验证凝聚因子试验。

两步法

血浆凝固酶阴性葡萄球菌两步法

材料 碱性磷酸酶试剂盒为上海长征公司产品；糖、尿素、鸟氨酸脱羧酶生化试验管与新生霉素药敏纸片、磷霉素药敏纸片购自美国BD公司；厌氧硫乙醇酸盐肉汤用Brewer配方，液面加凡士林，灭菌后换无菌橡皮塞。

方法 尿素、鸟氨酸脱羧酶试验管接种细菌后用消毒液状石蜡覆盖；碱性磷酸酶试验。

方法评价 对第一步鉴定出现相似结果的菌株，可根据提示选用第二步鉴定程序以省时并减少消耗。不能用本法鉴定的科恩、木糖、松鼠、缓慢葡萄球菌在人体内感染极为少见，必要时可用氧化酶、木糖、甘露醇等并参考有关资料进行鉴定。两步法低耗高效，有较高的实用价值。

参考资料

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