甲基绿—派洛宁

甲基绿、吡罗红为两种碱性染料。甲基绿分子有两个正电荷，易与双链脱氧核糖核酸结合，使DNA显示绿色，派洛宁分子有一个正电荷，易与核糖核酸结合，使RNA显示红色。

别名

甲基绿—派洛宁又叫unna试剂。

甲基绿与吡罗红混合使用时，即称为 甲基绿-派洛宁（又名：甲基绿-吡罗红）。

配制

取A液20 mL和B液80 mL混合配成染色剂。注意：该试剂应现配现用。

A液：配制方法一：取吡罗红甲基绿粉1 g，加入到100 mL蒸馏水中溶解，过滤后将滤液放入褐色瓶中备用。配制方法二：取甲基绿2 g溶于98 mL蒸馏水中，取吡罗红G 5 g溶于95 mL蒸馏水中。取6 mL甲基绿溶液和2 mL吡罗红溶液加入到16 mL蒸馏水中，即为A液，放入棕色瓶中备用。

B液：取乙酸钠16.4 g，用蒸馏水溶解至1 000 mL；再取乙酸12 mL，用蒸馏水稀释至1 000 mL。取配好的乙酸钠溶液30 mL和稀释的乙酸20 mL，加蒸馏水50 mL，配成pH为4.8的溶液。

特异染色原理

甲基绿—派洛宁（甲基 green-pyronin）为碱性染料，它分别能与细胞内的脱氧核糖核酸、核糖核酸结合呈现不同颜色。当甲基绿与吡罗红作为混合染料时，甲基绿与染色质中DNA选择性结合显示绿色或蓝色；派洛宁与核仁、细胞质中的RNA选择性结合显示红色。其原因可能是两种染料的混合染液中有竞争作用，同时两种核酸分子都是多聚体，而其聚合程度有所不同。甲基绿易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。而派洛宁则与聚合程度较低的RNA结合呈现红色（但解聚的DNA也能和派洛宁结合呈现红色）。即RNA对派洛宁亲和力大，被染成红色，而脱氧核糖核酸对甲基绿亲和力大，被染成绿色。

参考资料

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