吡罗红

吡罗红，英文名为Xanthylium,3,6-胺醚(dimethylamino)-, 氯化物，分子式是C17H19ClN2O。又名派洛宁G,吡罗红使核糖核酸呈现红色，常用于检测细胞中RNA的分布，常与甲基绿一起混用即为甲基绿—派洛宁（甲基 green-pyronin），碱性染料，它分别能与细胞内的脱氧核糖核酸、RNA结合呈现不同颜色。

简介

别名：Ammonium,[6-(dimethylamino)-3H-xanthen-3-ylidene]dimethyl-, chloride (8CI);

Methanaminium, N-[6-(dimethylamino)-3H-xanthen-3-ylidene]-N-methyl-, 氯化物;

Pyronine G (6CI);

Xanthylium, 3,6-胺醚(dimethylamino)-, chloride (9CI);

3,6-Bis(dimethylamino)xanthylium chloride;

C.I. 45005;

Pyronin G;

Pyronin GS;

Pyronin Y;

Pyronin 黄色;

Pyronine;

Pyronine GS;

Pyronine GY;

Pyronine Y;

Schultz no. 853

危险类别码：40：可能有不可挽回的作用的危险

染色原理

即吡罗红G,又名派洛宁G,吡罗红使核糖核酸呈现红色，常用于检测细胞中RNA的分布,。当甲基绿与派洛宁作为混合染料时，甲基绿与染色质中脱氧核糖核酸选择性结合显示绿色或蓝色；派洛宁与核仁、细胞质中的RNA选择性结合显示红色。其原因可能是两种染料的混合染液中有竞争作用，同时两种核酸分子都是多聚体，而其聚合程度有所不同。甲基绿易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。而派洛宁则与聚合程度较低的RNA结合呈现红色（但解聚的DNA也能和派洛宁结合呈现红色）。即核糖核酸对派洛宁亲和力大，被染成红色，而DNA对甲基绿亲和力大，被染成绿色。

使用配制方法

关于吡罗红和甲基绿分装粉的使用方法

试剂及配制方法

试剂

质量分数为0.9%的NaCl溶液，乙酸钠，乙酸，蒸馏水，吡罗红甲基绿混装粉。如果化学试剂商店没有吡罗红甲基绿混装粉，可以分别购买甲基绿和吡罗红G，然后按A液的第二种方法配制。

配制步骤

①染色剂A液的两种配制方法

第一种方法：取吡罗红甲基绿粉1 g，加入到100 mL蒸馏水中溶解，然后用滤纸过滤，将滤液放入褐色瓶中备用。

第二种方法：取甲基绿2 g溶于98 mL蒸馏水中，取吡罗红G 5 g溶于95 mL蒸馏水中。取6 mL甲基绿溶液和2 mL吡罗红溶液加入到16 mL蒸馏水中，即为A液，放入棕色瓶中备用。（注意：用于核酸染色的是吡罗红G，请不要错买吡罗红B。）

②染色剂B液的配制方法 B液是一种缓冲液，由乙酸钠和乙酸混合而成。先取乙酸钠16.4 g，用蒸馏水溶解至1 000 mL备用；再取乙酸12 mL，用蒸馏水稀释至1 000 mL备用。取配好的乙酸钠溶液30 mL和稀释的乙酸20 mL，加蒸馏水50 mL，配成pH为4.8的B液（缓冲液）。

③染色剂的配制 染色剂是由A液、B液混合配制而成的。取A液20 mL和B液80 mL混合，就是实验中所用的吡罗红甲基绿染色剂。应该注意的是该试剂应现配现用。

参考资料

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