异硫氰酸胍

异硫酸胍是一种化学物质，分子式是CH5N3·HSCN。

基本信息

简称 GITC

外观：白色结晶

熔点:115-120℃

PH(4%水溶液):4.5-7.0

紫外吸收(300nm,6M):≤0.1 abs unit

紫外吸收(410nm,6M):≤0.05abs unit

干燥失重:≤0.5%

用途：用于变性裂解细胞；提取核糖核酸和脱氧核糖核酸。无RNA酶和DNA酶活性

TRIzol是一种新型总RNA抽提试剂，可以直接从细胞或组织中提取总RNA。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。

提取

异硫氰酸胍法提取制备模板核酸此法主要用于RNA的提取。标本为组织细胞及血清等.

1.异硫氰酸胍消化液

异硫氰酸胍4mol/L

柠檬酸钠(PH7.0)25mmol/L

十二烷基肌酸钠0.5%

β-2-巯基乙醇0.1mol/L

2.消化方法：用50～100ul细胞悬液及血清，加等体积的异硫氰酸胍消化液振混匀后，或65℃1小时，或室温放置数分钟，然后加1/10体积的3mmol/LpH5.2的乙酸钠缓冲液，再加等体积的酚：三氯甲烷，用力振摇约10s，10000r/min，离心5min，取上清加等体积2-丙醇20℃放置3h后，14000r/min离心15min，沉定用75%冰冷乙醇离心洗涤1～2次，真空干燥，沉淀用TE缓冲液溶解即可用于逆转录PCR扩增，或放-20℃保存。

参考资料

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